Miért nem vág egy restrikciós enzim?
Miért nem vág egy restrikciós enzim?

Videó: Miért nem vág egy restrikciós enzim?

Videó: Miért nem vág egy restrikciós enzim?
Videó: Никогда еще не готовил так легко и так вкусно! ШАЛАНДЫ ЗАКУСКА из РЫБЫ 2024, Lehet
Anonim

Számos különböző oka lehet annak, hogy miért restrikciós enzim nem vág a DNS-t ebben a videóban áttekintve. A hasítandó DNS előkészítése kellene nem tartalmazhat olyan szennyeződéseket, mint a fenol, kloroform, alkohol, EDTA, detergensek vagy túlzott sók, amelyek mindegyike zavarhatja restrikciós enzim tevékenység.

Ebben a tekintetben miért nem vágják le a restrikciós enzimek a bakteriális DNS-t?

Baktériumok van restrikciós enzimek , más néven restrikciós endonukleázok , melyik vágott kétszálú DNS meghatározott pontokon töredékekre. Érdekes módon, restrikciós enzimek ne hasítsák fel a sajátjukat DNS . Baktériumok megakadályozzák a sajátjukat DNS a levágástól restrikciós enzim a metiláció révén korlátozás oldalak.

Az is felmerülhet, hogy hol vágnak a restrikciós enzimek? Restrikciós enzim Típusok Általában I. típus enzimek vágják DNS a felismerési szekvenciától távoli helyeken; II vágott DNS a felismerési szekvencián belül vagy ahhoz közel; típus III vágott DNS közeli felismerési szekvenciák; és a IV. típusú metilezett DNS-t hasítja.

Hasonlóképpen felteszik a kérdést, hogy mi történik, ha túl sok restrikciós enzimet adunk hozzá?

Előfordulhat hiányos emésztés amikor túl sok vagy is kis enzim használt. Az szennyeződések jelenléte benne az DNS minta tud gátolják az enzimek , ami szintén hiányos emésztést eredményez. Néhány restrikciós enzimek kofaktorokat igényel a teljes aktivitáshoz.

Miért nem működik a korlátozási kivonat?

Hiányos vagy nem emésztés a DNS-metiláció által blokkolt enzimaktivitás miatt. Ha az enzimje aktív és megemészti a kontroll DNS és az a reakció optimális körülmények között van beállítva, de még mindig látható problémák val vel emésztés , lehet azért, mert az Az enzimet a metiláció gátolja az templát DNS.

Ajánlott: