Meg tudod szekvenálni a PCR terméket?
Meg tudod szekvenálni a PCR terméket?

Videó: Meg tudod szekvenálni a PCR terméket?

Videó: Meg tudod szekvenálni a PCR terméket?
Videó: A real-time PCR elve és alkalmazása a SARS-CoV-2 kimutatására 2024, November
Anonim

Közvetlen Sorrendezés nak,-nek PCR termékek . Nagyon lehetséges közvetlenül sorrend a PCR termék a töredék klónozása nélkül. Közvetlen PCR szekvenálás ritkán sikerül, hacsak nem te szánjon rá egy kis időt ennek biztosítására te nem esnek bele egy a sok csapda közül.

Ilyen módon mi a szekvenáló PCR?

Közvetlen Sorrendezés nak,-nek PCR Termékek. Mindent el kell távolítania PCR primerek és nem beépült nukleotidok, mielőtt a termék sorrendben . Sorrendezés csak egy alapozót használ a kettő helyett PCR . Ha nem távolítja el mindkét alapozót, kettőt kap sorozatok egymásra helyezve, amelyek nem olvashatók.

Hasonlóképpen, használhatok PCR primereket a szekvenáláshoz? PCR primerek céljai vannak PCR amplifikáció, hogy amplikont kapjunk. Primerek szekvenálása vannak használt nak nek sorrend egy DNS-fragmenst, és felfedi DNS-ét sorrend azonosítani. 4. Kettő PCR primerek szükségesek a PCR reakció (általában); csak egy szekvenáló primer hozzáadódik a szekvenálás reakció.

Ezt szem előtt tartva, hogyan teszteli a PCR-termékeket?

Felismerése és elemzése PCR termékek . Az termék a PCR meghatározott hosszúságú DNS-fragmens vagy fragmentumok kell, hogy legyenek. Az amplifikált szekvenciák kimutatására számos technika használható (lásd a táblázatot). A legegyszerűbb és leggyakrabban használt technika az elektroforézis PCR termék agaróz gélen EtBr-mal (etidium-bromid).

Miért szükséges a PCR-termékek tisztítása a szekvenálás előtt?

Tisztítás DNS-t a PCR a reakció jellemzően szükséges valamihez későbbi felhasználás, és megkönnyíti az enzimek, nukleotidok, primerek és pufferkomponensek eltávolítását.

Ajánlott: