Hogyan működik a Gibson klónozás?
Hogyan működik a Gibson klónozás?

Videó: Hogyan működik a Gibson klónozás?

Videó: Hogyan működik a Gibson klónozás?
Videó: Gibson G Force: Установка и Настройка - by Nick Percev 2024, November
Anonim

Az Gibson klónozás A Master Mix három különböző enzimet tartalmaz egyetlen pufferben. Minden enzimnek sajátos és egyedi funkciója van a reakcióban: T5 exonukleáz – egyszálú DNS 3' túlnyúlásokat hoz létre a DNS 5' végéből való visszarágással. A komplementer DNS-fragmensek ezután egymáshoz kapcsolódhatnak.

Ezt figyelembe véve hogyan működik a Gibson?

Az Gibson Az Assembly® módszer egy olyan klónozási eljárás, amely lehetővé teszi két vagy több fragmentum klónozását anélkül, hogy restrikciós enzimes emésztésre vagy kompatibilis restrikciós helyekre lenne szükség. Ehelyett a felhasználó által meghatározott átfedő végeket építenek be a töredékekbe, hogy lehetővé tegyék a szomszédos töredékek zökkenőmentes összekapcsolását.

Hasonlóképpen, mi van a Gibson Assembly Master Mix-ben? Az Gibson Cloning Master Mix három különböző enzimből áll egyetlen pufferben. Minden enzimnek sajátos és egyedi funkciója van a reakcióban: T5 exonukleáz – egyszálú DNS 3' túlnyúlásokat hoz létre a DNS 5' végéből való visszarágással. A komplementer DNS-fragmensek ezután egymáshoz kapcsolódhatnak.

Ilyen módon hogyan működik a Golden Gate összeszerelés?

Arany Kapu klónozás ill Golden Gate szerelvény az olyan molekuláris klónozási módszer, amely lehetővé teszi a kutató számára, hogy egyidejűleg és irányítottan több DNS-fragmenst egyetlen darabba állítson össze IIs típusú restrikciós enzimek és T4 DNS-ligáz segítségével. Ez összeszerelés az in vitro végzett.

Hogyan működik a Gateway klónozás?

Az GATEWAY Klónozás A technológia azon a helyspecifikus rekombinációs rendszeren alapul, amelyet az 1. fág használ DNS-ének integrálására az E-be. A beépített fág DNS-t körülvevő attL és attR helyek helyspecifikusan rekombinálódnak a kimetszés során, hogy megreformálják az attP helyet az l-es fágban és a attB telephelye az E.

Ajánlott: